Pauley Perrette se narodila v New Orleans v Louisianě 27. 3. 1969. Kvůli zaměstnání otce se mnohokrát stěhovala. Později v talkshow The late late show with Craig Ferguson řekla, že žila v Georgii, Alabamě, Tennessee, Severní a Jižní Karolíně, New Yorku, New Jersey a v Kalifornii. Nyní bydlí v Los Angeles. 20. 10. 2000 se vdala za herce a muzikanta Coyoteho Shiverse, ale v únoru 2006 se rozvedli.
Studovala trestní soudnictví na Státní univerzitě Valdosta v Georgii. Později se přestěhovala do New Yorku, kde pokračovala ve studiu soudní psychologie a sociologie na John Jay college of criminal justice. V New Yorku vyzkoušela mnoho zaměstnání - barmanka, kadeřnice, fotografka, modelka, kuchařka na výletní lodi obeplouvající Manhattan. Během této doby ji přítelkyně seznámila s režisérem, který natáčel reklamy. Pauley začala kromě reklam točit videoklipy a krátké filmy a byla také dabérkou. Pak se přestěhovala do Los Angeles, kde se dostala k prvním malým rolím ve filmech a seriálech.
Její první rolí byla Shannon ve filmu Magical make-over (1994). V roce 1996 se objevila v seriálu Frasier (1993), v letech 1996 a 1997 v 10-ti epizodách seriálu Murder one (1995). Roku 1997 následoval seriál Veroničiny svůdnosti a film The price of kissing, o rok později seriály Jesse a That's life a filmy Hoofboy a Hand on the pump. V roce 2000 se objevila ve filmech Na pokraji slávy a Civility, o rok později ve filmu My first mister a seriálech 24 hodin, Dawsonův svět (1998). Roku 2002 si zahrála v hororu Kruh, akčním dramatu Krvavé nebe nebo v seriálu Pronásledovaný. V roce 2003 si zahrála forenzní analytičku Abby Sciuto ve dvou epizodách seriálu JAG (1995) - Ledová královna, Když tají ledy, jejichž sestříháním vznikl pilotní díl NCIS. Zahráli si s ní i její budoucí kolegové Mark Harmon, Michael Weatherly a David McCallum. Abby je zatím její nejúspěšnější role. Roku 2009 se objevila také v spin-off NCIS: Los Angeles, který navazuje na 6. řadu NCIS. Zahrála si také ve filmech Satan hates you, Superman vs. Elita a I am bad (oba 2012).
Pauley je také režisérka, producentka, spisovatelka, básnířka, fotografka a zpěvačka. V Los Angeles začala před NCIS vystupovat pod jménem Pauley P. jako zpěvačka dívčí skupiny Lo-Ball. Jejich známou písní je Can't get me down, která se objevila ve filmu Pravá blondýnka (2001). Ve 25. dílu 6. řady NCIS Aliah - Cesta zazněla píseň Fear, kterou napsala spolu s Tomem Polcem pod názvem Stop making friends a která se roku 2009 objevila na albu NCIS: The official TV soundtrack. Objevila se také ve videoklipu The Unnamed Feeling z alba St. Anger metalové skupiny Metallica. Založila vlastní nahrávací studio GO Records. V září 2005 se spolu se štábem Entertainment tonight podívala do kanceláří skutečné NCIS. Pro tiskovou agenturu Associated press řekla, že v mládí chtěla pracovat se zvířaty, být v rockenrollové skupině nebo být agentkou FBI. Podporuje mnoho charitativních organizací.
Bc. Jan "noelcoward73" Šrajer
